Descripción
Proteinasa K
Usada principalmente para digerir proteínas y eliminar la contaminación de las preparaciones de muestras de ácido nucleico.
La proteinasa K es una enzima proteolítica altamente activa estable >50 mg / ml en polvo y de 20 mg / ml en solución, que se purifica del molde Tritirachium album . La enzima tiene dos sitios de unión para Ca ++, que se encuentran a cierta distancia del sitio activo y no están directamente involucrados en el mecanismo catalítico. La alta actividad de la solución enzimática (0.6 U / µl) significa que puede mantener bajos los volúmenes de reacción (tan bajo como 200 µg / ml). También significa que puede esperar una digestión más completa de sus muestras.
- Utilizado para la digestión de la proteína queratina.
- Dos presentaciones: en polvo y solución
La solución de proteinasa k se usa para digerir proteínas y eliminar contaminantes de las preparaciones de muestras de ácido nucleico que pueden degradar el ADN y el ARN durante la purificación. Es ideal para esta aplicación, ya que la enzima es activa en presencia de productos químicos como SDS y urea.
Para una concentración final de 200 ug / ml, agregue 1 ml de solución de Proteinasa K a su muestra.
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| Catálogo |
Producto |
Presentación |
| IBISC12830 |
Proteinasa K |
100 mg |
| IBISC12820 |
Proteinasa K |
200 mg |
| IBISC12810 |
Proteinasa K en solución |
5 ml |
Información técnica
N. ° CAS: 39450-01-6
Peso molecular: ~ 18,000 Da
Actividad a 37 ° C (U / mg): Mín. 30 U / mg
Para preparar una solución de proteinasa K de 20 mg / ml (conc.)
TRIS: cloruro de calcio 10 mM: glicerol 1 mM:pH del 30%ajustado a 8.0 con HCl
Almacenamiento
Polvo: Almacenar a -20 ° C. Calentar a temperatura ambiente antes de abrir. Mantener bien cerrado.
Solución: Almacenar a + 4 ° C.
¿Cómo desactivo la Proteinasa K en mi muestra?
Calentar la muestra a 95 ° C durante 20-30 minutos.
¿Por qué la solución de Proteinasa K se nubló después de ser almacenada durante una semana? ¿Por qué la solución de Proteinasa K formó precipitados después de ser almacenada durante una semana?
Varios factores pueden ser responsables de estas condiciones. 1) Si se usa EDTA en la solución buffer, puede causar quelación del calcio y magnesio, causando turbidez 2) El cliente puede necesitar mezclar una solución nueva cada vez que use Pro-K en sus reacciones. 3) Si no se utiliza EDTA y se forman precipitados después del almacenamiento, la actividad no se ve afectada, vuelva a disolver los precipitados. 4) La solución recomendada es de 20 mg / ml, si se mezcla a una concentración mayor, el material puede salir de la solución. Poner de nuevo en solución, actividad no afectada.
¿Cómo se purifica la solución de proteinasa K?
La enzima se purifica por cromatografía.
¿Cuál es la mejor solución buffer para el uso de proteinasa K?
El calcio es un ingrediente clave para mantener la viabilidad de la enzima una vez en solución. La solución buffer ideal es la siguiente: TRIS 50 mM, pH 8,3 La solución de glicerol CaCl250% 3 mM se puede almacenar a -20 ° C con ciclos mínimos de congelación / descongelación, idealmente. De lo contrario, 2 ° – 8 ° C también es aceptable.
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